1、MOPS
MOPS Buffer,即3-ma啉丙磺酸缓冲液,属于生物缓冲剂,可作为二维凝胶电泳中等电聚焦电泳(IEF)的电解质系统成分;还可应用于Northern杂交,作为RNA的分离和转膜时的缓冲液。
常用的10×MOPS Buffer配制方法如下:
(1)称量41.8 g MOPS,溶解于约700mL DEPC处理水中;
(2)使用2 N NaOH 调节pH值至7.0;
(3)向溶液中加入DEPC处理的1M NaOAC 20mL、0.5M EDTA(pH8.0) 20mL;
(4)定容至1 L,用0.45 μm 滤膜过滤除去杂质,室温避光保存。
2、TAE
TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种(TAE和TBE)缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。
50×TAE Buffer 配制方法:
1。称量Tris 242g,EDTA 18.612g于1L烧杯中;
2。向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌均匀;
3。加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解;
4。用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。
使用时稀释50倍或100倍 即1×TAE Buffer 或 0.5×TAE。
3、TBE
TBE(Trispeng酸),是一种PCR技术中用到的缓冲液。
TBE配方:
1、使用液(0.5×)
0.045mol/L Tris- peng酸 0.001mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀,溶液体积为1L。
2、浓贮存液(5×)
54gTris碱 27.5g peng酸 20ml 0.5mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀,NaOH调pH至8.0,溶液体积1L。